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                尺寸排阻色譜柱的特點與清洗方法

                更新時間:2019-04-23瀏覽:3412次
                尺寸排阻色譜SEC)是一種分析技術,可以按尺寸并根據從填有多孔硅膠的色譜柱中洗脫的情況來分離已溶解的大分子,用于測量蛋白質分子量、結構、大小及構成。
                 
                當 SEC 與光散射、粘度計以及濃度檢測器相結合(稱為三重檢測)時,可測量分子量、分子大小和特性粘度,并生成關于大分子結構、構象聚集與支化方面的信息。
                 
                通過使用 SEC 來測量分子量和其他特性,可以對蛋白質、合成聚合物和多糖類之類的天然聚合物等分子進行表征。 
                 
                尺寸排阻色譜的特點:
                 
                1.保留時間是分子尺寸的函數,有可能提供分子結構的某些信息。
                2.保留時間短,譜峰窄,易檢測,可采用靈敏度較低的檢測器。
                3.固定相與分子間作用力極弱,趨于零。由于 ,柱子不能很強保留分子因此柱壽命長。
                4.不能分辨分子大小相近的化合物,相對分子質量差別必須大于10%能得以分離。
                5.大分子的流程短,移動速度快,先流出色譜柱;小分子的流程長,移動速度慢,后流出色柱;而中等分子居兩者之間。
                6.生物相容性好,有很高的活性回收率。
                 
                尺寸排阻色譜柱的清洗:
                 
                多次使用后某些樣品可能會吸附到入口篩板或填料上,當積累至一定程度時會出現壓力升高并伴隨峰型展寬的現象,此時需要清洗色譜柱。一般流程為:斷開檢測器,反接色譜柱,在低于50%較大推薦流速下用清洗液沖洗10-15倍柱體積。
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